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特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產品名稱:木質素含量測試盒微量法
產品規格:100管/96樣
檢測方法:微量法
產品貨號:BK-01S6950
產品分類:其它系列
商品介紹:
測定意義: 木質素是構成植物細胞壁的成分之一,是由聚合的芳香醇構成的一類物質,存在于木質組織中,主要作用是通過形成交織網來硬化細胞壁。木質素主要位于纖維素纖維之間,起抗壓作用。 測定原理 木質素中的酚羥基發生乙?;笤?span style="font-family:Calibri">280nm處有特征吸收峰,280nm的吸光值高低與木質素含量正相關。 需自備的儀器和用品 天平、40目篩,玻璃試管、燒杯、離心機,恒溫水浴鍋、烘箱、封口膜、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、高氯酸,濃硫酸。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本: 先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
5KU β- 半乳糖苷 Galactosidase,Beta 4℃保存
2 ug pET-43.1b(+) pET-43.1b(+) 低溫運輸,-20℃保存
錳鹽營養瓊脂 Mn2+Nutrient Agar 250g
1瓶 BNL 1ME A.7R.1(實體瘤)細胞株 BNL 1ME A.7R.1(實體瘤) 低溫運輸和保存
玫瑰紅鈉瓊脂顆粒 Rose Bengal Agar Medium 300ml/袋*10
100次 RAPD PCR試劑盒(含銀染) RAPD PCR Kit 除PCR MagicMix 2.0需要-20℃保存外,其余成分可以保存
500mL MOPS Buffered Saline,5X,pH7.4 MOPS Buffered Saline,5X,pH7.4 常溫保存
50次 加T試劑盒 dT Tailing Kit -20℃保存
2 ug pMIG-Aalpha E64G pMIG-Aalpha E64G 低溫運輸,-20℃保存
50μg KT5823(PKG抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
1瓶 SK-MEL-5細胞株 SK-MEL-5 低溫運輸和保存
木質素含量測試盒微量法Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗人IgG F(ab')2 規格: 0.1ml
CD229/SLAMF3 CD229抗體 規格: 0.2ml
C1orf25 1號染色體開放閱讀框25抗體 規格: 0.2ml
Trop-2 原肌球蛋白抗體 規格: 0.1ml
Phospho-MAPKAPK2(Ser272) 磷酸化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體 規格: 0.1ml
Escherichka coli K88-K99/ETECK88 豬源產腸毒素性大腸桿菌K88-K99抗體 規格: 0.2ml
Cancer/testis antigen 1B/1A 瘤/睪抗原1B/1A 0.2ml
ELMO1 吞噬細胞運動蛋白1抗體 規格: 0.2ml
CUEDC2/CUE domain containing 2 CUE結構域蛋白2抗體 規格: 0.2ml
HSD17B6 17-β-羥脫6抗體 規格: 0.1ml
Rabbit Anti-Biotin/FITC FITC標記的兔抗抗體IgG 規格: 0.1ml
CREG2 E1A激活基因刺激蛋白2抗體 規格: 0.2ml
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。
若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。
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