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實驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:
① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
共價結合型果膠(CSP)含量測試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S7005 |
商品介紹:
測定意義: 果膠是構成細胞初生壁和中膠層的主要成分,主要由原果膠、果膠酸甲酯和果膠酸組成。果膠中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等,是許多高等植物細胞壁中含量的多糖成分,其*的物理、化學性質影響著植物源食品的口感和品質。果膠間以Ca2+橋及其他離子鍵、氫鍵、糖苷鍵、酯鍵和苯環偶聯的方式交聯,通過不同的抽提方法可以提取各種形式的果膠,如水溶性果膠(WSP)、離子結合型果膠(ISP)和共價結合果膠(CSP)。 測定原理: 利用帶有螯合劑的堿溶液提取共價結合型果膠(CSP),采用咔唑比色法測定果膠含量。果膠水解成半乳糖醛酸,在硫酸溶液中與咔唑試劑進行縮合反應,生成物質在530 nm處有最大吸收峰。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、80%乙醇、丙酮、濃硫酸(不允許快遞)、研缽和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
2 ug pBAD His C-LacZ pBAD His C-LacZ 低溫運輸,-20℃保存
100mL 白細胞裂解液 White Cell Lysis Solution 4℃保存
2 ug pDsRed-N1 pDsRed-N1 低溫運輸,-20℃保存
哥倫比亞 Columbia Medium 250g
25g L- L-Tyrosine 室溫避光保存
50T 乙型脊髓灰質炎病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
200 mL 小鼠單核細胞分離液1.090 Cell Separation Solution -20℃保存
250mL HEPES Buffer,1M,pH9.0 HEPES Buffer,1M,pH9.0 常溫保存
0.5mL dTTP溶液,100mM dTTP Solution -20℃保存
2 ug pLKO.1 - TRC cloning vector pLKO.1 - TRC cloning vector 低溫運輸,-20℃保存
Letheen瓊脂 Letheen Agar 250g
共價結合型果膠(CSP)含量測試盒微量法Nuclear Matrix Protein p84/NMP84 核基質p84蛋白抗體 規格: 0.2mlDlx1 同源轉錄因子DLX1抗體 規格: 0.2ml
GilZ/TilZ 糖皮質激素誘導亮拉鏈蛋白抗體 規格: 0.2mlPhospho-EGFR(Ser991) 磷酸化表皮生因子受體抗體 規格: 0.1ml
Actin α/alpha-SMA 肌動蛋白α(α-SMA)抗體 0.1ml
ANKS1B/AIDA1 β淀粉樣蛋白胞內結構域相關蛋白1抗體 規格: 0.2ml
Phospho-NFKB1(Ser338) 磷酸化細胞核因子p50/k基因結合核因子抗體 規格: 0.1ml
TPD52/Prostate and colon associated protein 前列和結腸相關蛋白 規格: 0.2ml
Acetyl-Histone H2A(K5) 乙?;M蛋白H2A抗體 規格: 0.1ml
Claudin 14 緊密連接蛋白14抗體 規格: 0.2ml
CKLFSF2/CMTM2 趨化素樣因子超家族成員2抗體 0.2ml
FES 原基因酪蛋白激FES抗體 規格: 0.2ml
Rabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗猴IgM 規格: 0.1ml
HAPLN2 透明質酸及粘蛋白2抗體 規格: 0.2ml
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