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實驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:
① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
果膠甲酯化程度測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S7011 |
商品介紹:
測定意義: 植物細胞壁中的果膠是植物初生細胞壁的主要成分,除了起結構支撐、物質運輸等作用外,還具有抵抗逆境的作用。果膠甲酯化程度影響了細胞壁的堅韌程度及其抗性。 測定原理 果膠甲酯鍵經皂化處理后釋放出甲醇,甲醇與2,4-戊二酮反應顯色,在412nm下測定吸光值;同時半乳糖醛酸在70℃下與濃硫酸反應生成5-甲酰基-2-呋喃甲酸,5-甲?;?/span>-2-呋喃甲酸與3,5-二甲基反應產生有色物質,在450nm下有最大吸光值。以甲醇生成量與半乳糖醛酸含量的比值代表果膠甲酯化程度。 自備實驗用品及儀器 天平、低溫離心機、酶標儀、96孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水、硫酸。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
2 ug pCMV-SPORT6 TMTC1 pCMV-SPORT6 TMTC1 低溫運輸,-20℃保存
HBI副溶血性弧菌生化鑒定條(新國標) 5條/盒
100g 聚乙烯吡咯烷酮 40000 Polyvinylpyrrolidone(PVP40000) 室溫干燥保存
50T 溶藻弧菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
1 g L-Glutathione (reduced form)(抗氧化劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250mL EDTA Solution(EDTA溶液),0.5M,pH7.4 EDTA Solution,0.5M,pH7.4 常溫保存
1.5mL 酵母tRNA溶液B(精提)(5mg/mL) Yeast tRNA Solution -20℃保存
2 ug pLenti6/V5-DEST pLenti6/V5-DEST 低溫運輸,-20℃保存
麥康凱瓊脂3號 Maconkey Agar No.3 250g
1瓶 L7912細胞株 L7912 低溫運輸和保存
PPLO肉湯 PPLO Broth 250g
果膠甲酯化程度測試盒微量法IKK gamma/IKBKG KB抑制蛋白激γ抗體 規格: 0.2mlphospho-CaMK2 alpha (Tyr231) 磷酸化鈣/鈣調素依賴蛋白激2α抗體 規格: 0.1ml
GABRA3/GABA A Receptor alpha 3 G氨基丁酸受體α3抗體 規格: 0.2mlNIS 鈉碘轉運體蛋白抗體 規格: 0.2ml
DAT1/LIM domain only 3 神經細胞特異性轉錄因子DAT1抗體 規格: 0.2mlH1N1 Hemagglutinin 2 甲型毒凝素抗體 規格: 0.1ml
DAP1 死亡相關蛋白1抗體 規格: 0.2mlSGLT1/GLT 1 鈉-糖共轉運載體1抗體 規格: 0.1ml
human Fibrinogen Monoclonal 人纖維蛋白原單克隆抗體 規格: 0.2mlBPIL3 殺菌/通透性增加蛋白樣3抗體 規格: 0.2ml
MIA2 黑色素瘤抑制活性蛋白2抗體 規格: 0.2mlCGA/ Chromogranin A 嗜鉻粒素A抗體 規格: 0.1ml
ChRM2/Acetylcholine receptor(M2) 毒蕈堿型乙酰受體抗體 規格: 0.1mlCYP2E1 細胞色素P450ⅡE1抗體 規格: 0.1ml
NTF97/KPNB1 親核素β1抗體 規格: 0.1mlATM 毛細管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體 規格: 0.1ml
Matriptase 2 膜型絲蛋白2抗體 規格: 0.2mlMEK1/2(MAPKK1) 絲裂原活化蛋白激激1抗體 規格: 0.1ml
LPAP 淋巴細胞磷蛋酸相關蛋白抗體 規格: 0.1mlERK2/MAPK1 絲裂原活化蛋白激1抗體 規格: 0.1ml
HRH4/GPCR105 組織胺H4受體抗體 規格: 0.1ml
COPS8 信號轉導蛋白亞基8抗體 規格: 0.2ml
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