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商品介紹:
測定意義: 植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類酶的總稱,屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉化為可供有機體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對環境的污染,改善營養成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應用價值。 測定原理 植酸酶在一定溫度和pH值條件下,水解底物植酸鈉生成無機磷與肌醇衍生物,無機磷在酸性環境中與鉬酸銨顯色劑反應生成藍色復合物,在700nm處有特征吸收峰,根據700nm處吸光值變化可計算得植酸酶活性。 自備實驗用品及儀器 天平、低溫離心機、可見分光光度計、微量石英比色皿、恒溫水浴鍋,超聲溶解器,回旋式振蕩器。 |
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
植酸酶測試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S6939 |
實驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:
① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
支原體檢測
2 ug pUG6.0 pUG6.0 低溫運輸,-20℃保存
含225mlGN增菌液均質袋 GN Enrichment Broth 10個/包
2000 U 限制性內切ApaI Restriction Endonuclease -20℃保存
250mL Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.2 Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.2 常溫保存
5mL 素 B 硫酸鹽 Polymyxin B Sulfate Solution 4℃避光保存
2 ug pQE-2 pQE-2 低溫運輸,-20℃保存
7%NaCl胰胨水 20支
2 ug pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-Puro pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-Puro 低溫運輸,-20℃保存
靛基質試驗用 Indole Test Medium 250g
2 ug pLVUT-tTR-KRAB pLVUT-tTR-KRAB 低溫運輸,-20℃保存
植酸酶測試盒微量法Staphyloccocus aureus Rosenbach tropina 金菌體蛋白抗體 規格: 1mlDonkey anti-Gpig IgG whole serum 驢抗豚鼠IgG抗清 規格: 1ml
Rabbit Anti-Avidin/PE PE標記的兔抗親和素 規格: 0.1mlPLCG 1/PLC gamma 1 磷酯Cγ1抗體 規格: 0.2ml
SOD2 超氧化物歧化2抗體 規格: 0.1ml
ENTHD1/Epsin2B Epsin2B蛋白抗體 規格: 0.2ml
Galactosidase alpha α-半糖苷抗體 規格: 0.2ml
GPR78 G蛋白偶聯受體78抗體 規格: 0.2ml
Phospho-cdc25A (Ser124) 磷酸化細胞分裂周期蛋白25抗體 規格: 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgG/APC APC標記的兔抗大鼠IgG 規格: 0.1ml
WNK1 賴缺陷型蛋白激1抗體 規格: 0.2ml
phospho-Ephrin B(Ser300) 磷酸化Ephrin B抗體 規格: 0.1ml
DDIT4/REDD1 DNA損傷誘導轉錄蛋白4抗體 規格: 0.1ml
TGF Beta 1(CT) 轉化生因子β1抗體 規格: 0.2ml
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