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實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產品名稱:水樣中汞離子(Hg2+)濃度測試盒微量法
產品規格:100管/96樣
檢測方法:微量法
產品貨號:BK-01S6798
產品分類:離子系列
商品介紹:
測定意義: Hg2+是水體中重要有毒重金屬離子,易被生物體吸收并且積累,能夠通過食物鏈進一步傳遞,從而造成傷害。典型的水俁病就是汞中毒的一種。 測定原理: 水樣經消化后,在酸性環境中,Hg2+能與二硫腙生成橙色絡合物,溶于,在490nm測定吸光度,即可計算Hg2+含量。 自備儀器和用品: 恒溫水浴鍋、可調式移液槍、濃硫酸、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本: 先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。
若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。
50µg Xa因子蛋白 Factor Xa Protease -20℃保存
125mL RNase-Free TE Buffer(無RNase的TE緩沖液),pH8.0 RNase-Free TE Buffer,pH8.0 常溫保存
1瓶 2V6.11細胞株 2V6.11 低溫運輸和保存
2 ug pRNATin-H1.2/Hygro pRNATin-H1.2/Hygro 低溫運輸,-20℃保存
50次 血液RNAout Blood RNAOUT 4℃保存
2 ug pcDNA3-YFP pcDNA3-YFP 低溫運輸,-20℃保存
面包酵母標準 250g
25mL 四甲基乙二胺 N,N,N',N'-Tetramethylethylenediamine(TEMED) 4℃避光保存
50T 牛特定基因序列PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
50 mg Cisplatin (DNA交聯劑/細胞凋亡誘導劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
500mL Blotto-Tween in PBS Blotto-Tween in PBS 常溫保存
水樣中汞離子(Hg2+)濃度測試盒微量法CSTF2T/CstF-64 細胞分裂相關蛋白CSTF64抗體 規格: 0.2ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/FITC FITC標記的兔抗小鼠k鏈 規格: 0.1ml
ATF6 活化轉錄因子6抗體 規格: 0.1ml
Goat Anti-Bovine IgG/Gold 膠體金標記的羊抗牛IgG 規格: 0.5ml
SGPL1 磷酸鞘氨醇裂解1抗體 規格: 0.1ml
ASB7 含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族7抗體 規格: 0.2ml
Rap2A Rap2A抗體 規格: 0.2ml
ATE1 tRNA的蛋白轉移1抗體 規格: 0.2ml
Inhibin beta B 抑制素βB/Inhibin β B抗體 規格: 0.1ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗豚鼠IgM 規格: 0.1ml
CCP 瓜環肽抗體 規格: 0.2ml
Phospho-BLNK(Tyr491) 磷酸化T淋巴細胞連接蛋白抗體 規格: 0.1ml
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