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本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
麥芽糖含量測試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S6731 |
商品介紹:
測定意義: 麥芽糖是由兩個葡萄糖單位經由α-1,4糖苷鍵連接而成的二糖,又稱麥芽二糖。麥芽糖是淀粉、糖原、糊精等大分子多糖類物質在β-催化下的主要水解產物,再經麥芽糖酶催化,則被水解成兩個葡萄糖分子。麥芽糖不僅參與了生物體內糖代謝,其在食品和醫藥工業等行業也著廣泛應用,是產品質量控制的重要指標之一。 測定原理: 麥芽糖酶將樣品中麥芽糖水解為葡萄糖; 葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并產生過氧化氫;過氧化物酶催化過氧化氫氧化4-氨基偶聯酚,生成有色化合物,在505 nm有特征吸收峰。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽和蒸餾水 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
實驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:
① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
0.1mg 山羊抗兔IgG,異硫酸熒光素標記 Goat Anti-Rabbit IgG ,FITC Conjugate 4℃保存
1瓶 MC3T3-E1 Subclone 14細胞株 MC3T3-E1 Subclone 14 低溫運輸和保存
Culture培養基 Culture Medium 250g
25KU 多氧化 ( 菌菇 ) Polyphenol Oxidase (Mushroom) -20℃保存
1000mL TBE,10X TBE,10X 常溫保存
20次 一站式His標記蛋白質微量純化套裝(溶破細胞) One-Stop His-Tagged Protein Miniprep Pack 介質請于20%乙醇中4℃保存,PMSF于-20℃保存,其余試劑5℃放置
2 ug pSUPER-retro-neo pSUPER-retro-neo 低溫運輸,-20℃保存
100mL --異戊醇混合液 Phenol-Chloroform-Isoamylol 常溫避光保存
2 ug pCo Hygro pCo Hygro 低溫運輸,-20℃保存
素B(2.25萬單位) 2.25萬單位*5支
25g 葡聚糖凝膠 G-10 Sephadex G-10 室溫保存
麥芽糖含量測試盒微量法phospho-RUNX3(Ser338) 磷酸化Runx3抗體 規格: 0.1ml
envelope glycoprotein (Dengue virus type-2) 登革抗體 規格: 0.2ml
Thioredoxin 2 線粒體硫氧還蛋白2抗體 規格: 0.1ml
Goat Anti-Mouse IgM/Cy7 Cy7標記的羊抗小鼠IgM 規格: 0.1ml
Phospho-NPM (Thr95) 磷酸化核仁磷酸蛋白抗體 規格: 0.1ml
NME6/IPIA ALPHA P53誘導細胞凋亡抑制蛋白α抗體 規格: 0.2ml
PTGEs 前列素E合成抗體 規格: 0.1ml
Ly-6G/Gr-1 淋巴細胞抗原6G抗體 規格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗人IgG F(ab')2 規格: 0.1ml
IGFBP3 胰島素樣生因子結合蛋白3抗體 規格: 0.1ml
CD4 CD4抗體 規格: 0.1ml
TRAK1 驅動蛋白結合蛋白1抗體 規格: 0.2ml
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