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商品介紹:
測定意義: 幾丁質主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨),以及真菌類的細胞壁中。而幾丁質酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質水解,具有抵御真菌侵染的作用,成為抗真菌病害的研究熱點。 測定原理: 幾丁質酶水解幾丁質產生N-乙酰氨基葡萄糖,進一步與DNS試劑反應產生棕紅色化合物,在540nm處有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了幾丁質酶的活性。 自備實驗用品及儀器 天平、水浴鍋、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(土壤樣品專用)和蒸餾水。 |
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
幾丁質酶測試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S6751 |
實驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:
① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
2 ug pGEM Ex1 pGEM Ex1 低溫運輸,-20℃保存
抗生素檢定培養基6號(PH7.2-7.4) 500g
1瓶 EAC細胞株 EAC 低溫運輸和保存
含225ml鹽緩沖液均質袋 Phosphate Buffered Saline 10個/包
2000U T4 RNA 連接 2 (截短型 K227Q) T4 RNA Ligase 2(truncated K227Q) -20℃保存
250mL RIPA Buffer with EDTA & EGTA RIPA Buffer with EDTA & EGTA 常溫保存
1mL 溶液,50mg/mL Dexamethasone DXM Solution -20℃避光保存
2 ug pPROEX HTc pPROEX HTc 低溫運輸,-20℃保存
醇發酵管 20支
2 ug pCAMBIA1405.1 pCAMBIA1405.1 低溫運輸,-20℃保存
10%纖維二糖水溶液 5ml×10支
幾丁質酶測試盒微量法phospho-TCF3/E47/E2A(Thr355) 磷酸化轉錄因子3抗體 規格: 0.1ml
phospho-EGFR (Tyr1172) 磷酸化表皮生因子受體抗體 規格: 0.1ml
CACH3/CaV1.3 L型鈣通道蛋白a1亞型3抗體 規格: 0.2ml
MALT1 粘膜相關淋巴組織轉運蛋白1抗體 規格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy5 Cy5標記的兔抗人IgG F(ab')2 規格: 0.1ml
ABCA7 三磷酸苷結合盒轉運蛋白7抗體 規格: 0.2ml
GIRK1 G蛋白激活內向鉀通道1抗體 規格: 0.1ml
gremlin 骨形態形成蛋白拮抗蛋白抗體 規格: 0.1ml
CLCA4 鈣激活氯離子通道4抗體 規格: 0.1ml
BST2/CD317 骨髓基質干細胞抗原2抗體 規格: 0.2ml
phospho-Rb/p105-Rb(Ser780) 磷酸化成視網膜細胞瘤抑蛋白抗體 規格: 0.1ml
ED-1 外胚層發育不良抗體 規格: 0.1ml
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