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實驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:
① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
海藻糖酶測試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S6717 |
商品介紹:
測定意義: THL(EC 3.2.1.28)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中。海藻糖酶主要功能在于生物體分解海藻糖生成葡萄糖而直接用于能量供應。 測定原理: 采用3.5-二硝基水楊酸法測定THL催化海藻糖產生的還原糖的含量。還原糖與3.5-二硝基水楊酸共熱生成棕紅色的氨基化合物,在一定范圍內還原糖的量和反應液的顏色深度成正比,由此判斷THL活性的高低。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
LB瓊脂(lennox) 250g
100次 柱式質粒 DNAout Column Plasmid DNAOUT 常溫保存(RNase A溶液4℃保存)
2 ug pET-32 Xa/LIC pET-32 Xa/LIC 低溫運輸,-20℃保存
無菌檢查培養基
1瓶 A204細胞株 A204 低溫運輸和保存
1個 15mLDNA超濾離心管(30-50KD)
24 T 總抗氧化能力測試盒(比色法) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
500mL MES SDS Running Buffer,20X MES SDS Running Buffer,20X 常溫保存
100次 真菌種屬鑒定 PCR Mix 2(UN) Fungal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
50T 人雌激素受體基因PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
克氏檸檬酸鹽培養基 250g
海藻糖酶測試盒微量法phospho-P53(Thr55) 磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規格: 0.1ml
GCOM1 GCOM1蛋白抗體 規格: 0.2ml
phospho-RKIP (Ser 153) 磷酸化Raf激抑制蛋白抗體 規格: 0.1ml
phospho-IKK beta(Tyr199) 磷酸化KB抑制蛋白激β抗體 規格: 0.1ml
LGALS3BP 可溶性半糖凝集素3結合蛋白抗體 規格: 0.2ml
Rabbit Anti-Bov IgG/APC APC標記的兔抗牛IgG 規格: 0.1ml
S100A4 S100A4抗體 規格: 0.1ml
PRPF4 PRPF4蛋白抗體 規格: 0.2ml
ADCK1 ADCK1蛋白抗體 規格: 0.2ml
Goat Anti-rat IgG 羊抗大鼠IgG 規格: 1mg
KAT13A/SRC1 類固醇受體激活蛋白1抗體 規格: 0.2ml
ZHX2/Alpha fetoprotein regulator 1 甲胎蛋白調節蛋白1抗體 規格: 0.2ml
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