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實驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:
① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
中性轉化酶(NI)測試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S6711 |
商品介紹:
測定意義: 蔗糖轉化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關鍵酶之一。根據最適 pH,將高等植物Ivr分為酸性轉化酶(AI)和中性轉化酶(NI)兩種類型。 NI主要存在于細胞質中,負責分解細胞質中蔗糖為果糖和葡萄糖。 測定原理: NI催化蔗糖分解產生還原糖,進一步與3,5-二硝基水楊酸反應,生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內510nm光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計算NI活性 自備用品: 可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
50T 流行性出血熱漢坦病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
0.1mg 山羊抗小鼠IgG,熒光素488標記 Goat Anti-Mouse IgG ,IF488 Conjugate 4℃保存
2 ug pBIND pBIND 低溫運輸,-20℃保存
10mL TE緩沖液,PH8.5
2 ug pFastBac1 pFastBac1 低溫運輸,-20℃保存
沙氏葡萄糖液體培養基(2015藥典) Sabouraud Dextrose Broth 250g
1瓶 C3H/10T1/2,Clone 8細胞株 C3H/10T1/2,Clone 8 低溫運輸和保存
大腸菌群顯色培養基 Coliform Chromogenic Medium 1000(ML)
50U T4 DNA 聚合 T4 DNA Polymerase -20℃保存
500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH4.4 Phosphate Buffer,0.2M, pH4.4 常溫保存
0.1mL×10 BL21(DE3)化學感受態細胞 BL21 (DE3) Competent Cell -80℃保存
中性轉化酶(NI)測試盒微量法Rabbit anti-human IgM whole serum 兔抗人IgM抗清 規格: 1ml
Lingo-1 Nogo受體反應蛋白抗體 規格: 0.1ml
Adenovirus 5 E1A 毒早期E1A蛋白抗體 規格: 0.2ml
Rabbit Anti-human sIgA/Cy7 Cy7標記的兔抗人分泌型IgA 規格: 0.1ml
Peptide YY/PYY 酪酪肽抗體 規格: 0.2ml
HIG1/HIGD1A 缺氧誘導基因1蛋白抗體 規格: 0.2ml
ART4/CD297 二磷酸苷核糖基轉移4抗體 規格: 0.2ml
VEGF 管內皮生因子抗體 0.1ml
CQ028 多基因下調蛋白抗體 規格: 0.2ml
APE/Girdin 肌動蛋白結合蛋白Girdin抗體 規格: 0.1ml
Mouse Anti-Rabbit IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標記的小鼠抗兔IgM 規格: 0.1ml
beta-Amyloid(31-35) β淀粉樣肽(31-35)抗體 規格: 0.1ml
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