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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
EB病毒轉化的人B細胞;KMY1022粘蛋白質量規格：Type I-S; from bovine submaxillary glandsMucin from bovine submaxillary glands

L1CAM Others Human 人 CD171 / NCAML1 / L1CAM 人細胞裂解液 (陽性對照) N,N'-二琥珀基碳酸酯(>98%,EP)質量規格：>98%,EPN,N'-Disuccinimidyl carbonate (DSC)

CM-R021大鼠胰腺上皮細胞*培養基100mL滂胺天藍(~50%,BS)質量規格：~50%,BSChicago sky blue 6B

ANGPTL7 Others Cynomolgus 食蟹猴 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 人細胞裂解液 (陽性對照) 氯銨-T三水(>98%,BR)質量規格：>98%,BRChloramine T, trihydrate

人結膜上皮細胞HConEC卡拉唑E(>70%,BS)質量規格：>70%,BSChlorazol black E
FIGF Others Mouse 小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 人細胞裂解液 (陽性對照) 霉素,柱晶白霉素質量規格：效價≥1300U/MG,BRKitasamycin

人胰島β細胞*培養基 100mL拉坦前列腺素質量規格：含量>99.0%Latanoprost

RD細胞，人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞 屎腸球菌 艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich酮咯酸質量規格：>98%Ketorolac

CCL2 Protein Mouse 重組小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 (His 標簽)來氟米特質量規格：>98.5%,USP31,BRLeflunomide

MADB106(大鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照) 來氟米特（標準品）質量規格：HPLC>98%,標準品Leflunomide
Calu-3(人肺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0062CHO-K1(倉鼠卵巢細胞亞株)5×106cells/瓶×2 正常小鼠Leydig細胞;TM3維E煙酸酯(標準品)質量規格：HPLC≥98%,標準品(±)-α-Tocopherol nicotinate

兔間變表皮鱗癌瘤株;VX2熒光素-5-馬來質量規格：HPLC>97.0%,進口Fluorescein-5-maleimide

人前列腺上皮細胞(HPEpiC)(5×105)Veliparib (ABT-888)質量規格：>98%Veliparib (ABT888)

CL-0131KB(人口腔表皮樣癌細胞)5×106cells/瓶×2萘夫西林鈉質量規格：>98%,BRNafcillin  salt monohydrate

人非小細胞肺癌細胞;NCI-H23 大鼠視網膜muller細胞 100mL苯佐卡因-d4質量規格：美國進口Benzocaine-d4
快速瑞氏-姬姆薩復合染液21. 臍帶細胞系統卡托普利二硫化物Captopril Disulfide質量規格：美國進口

CM-H104成纖維細胞*培養基100mL氯地孕酮Chlormadinone質量規格：美國進口

小鼠胚胎成纖維細胞;PA317 小鼠小腸平滑肌細胞*培養基 100mL醋酸氯地孕酮-d5Chlormadinone-d5 Acetate質量規格：美國進口

RN-c, 大鼠皮質神經元 Rattus可的Cortisone質量規格：美國進口

F11R Others Mouse 小鼠 F11R / JAM-A / JAM-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-羥-丹曲林5-Hydroxy Dantrolene質量規格：美國進口
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。