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產品名稱 | Western Blot檢測試劑盒 |
檢測方法 | 詳見說明 |
規格 | 10T |
貨號 | BK-S64162 |
儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
GDF15 Protein Human 重組人 GDF-15 蛋白 (Fc 標簽)鹽酸特拉唑嗪(標準品)質量規格:含量測定Terazosin HCl
人肝竇內皮細胞 (HHSEC) ( 5×105 ) 大鼠骨髓間充質干細胞(BMSCs) Rattus氯化鈉(標準品)質量規格:含量測定 chloride
小鼠肝癌細胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]氨力農(標準品)質量規格:UV法含量測定Amrinone
SERPINB3 Others Human 人 SerpinB3 / SCCA-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 更昔洛韋(標準品)質量規格:含量測定Ganciclovir
CM-R102大鼠腦靜脈血管內皮細胞*培養基100mL反式玉米素葡萄糖苷質量規格:美國進口trans-Zeatin glucoside
ACVR2B Others Mouse 小鼠 ACIIB / ACVR2B 人細胞裂解液 (陽性對照) 醋酸環丙孕酮(標準品)質量規格:含量測定Cyproterone acetate
大額牛腎細胞;BFR-K1甲地孕酮質量規格:>98.5%,BRMegestrol base
人腎系膜細胞 (HRMC)(1×106 )煙酸乙酯(>98%,BR)質量規格:>98%,BREthyl nicotinate
CL-0179P19(小鼠畸胎瘤細胞)5×106cells/瓶×2二茂鐵質量規格:>98%Ferrocene
人結直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T] 大鼠雪旺氏細胞*培養基 100mL反苯環丙胺鹽酸鹽;單胺氧化酶(MAO)抑制劑質量規格:>97%,單胺氧化酶(MAO)抑制劑Tranylcypromine (2-PCPA) HCl
人表皮角質細胞RNAHEK miRNA5 μg羥胺溶液100克
ACO1 Others Human 人 ACO1 / irp1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 本加醋膽酯 Cholqstqryl bqnzoctq 604-3-0
兔間變表皮鱗癌瘤株;VX23-異丁基-1-黃... 3-Isobutyl-1-methylxanthine (≥99%, IB... 28822-58-4 100MG 通用試劑
BxPC-3細胞,原位胰腺腺癌細胞 鼠骨髓瘤細胞,P3X63-Ag8.653細胞 人食管癌細胞;EC109放現菌肉湯培養基支RT
BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1(魚精DNA)
Western Blot檢測試劑盒Promocell C-22020 Endothelial Cell GrowthMedium MV, 內皮細胞生長培養基MV(即用型) 500ml鏈脲佐菌素(標準品)Streptozocin質量規格:HPLC>98%,標準品
人食道上皮細胞裂解物HEEpiCL硝酸硫康唑Sulconazle Nitrate質量規格:>98.0%,JP2002
HEXA Others Human 人 Hexosaminidase A / HEXA Subunit A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 硝酸硫康唑(標準品)Sulconazle Nitrate質量規格:HPLC>98%,標準品
人結直腸腺癌細胞;HCT-15 [HCT15]舒尼替尼堿Sunitinib base質量規格:>98.5%
Acc-2細胞,涎腺腺樣囊性癌細胞 人胃腺癌細胞,MGC-803細胞 兔晶體上皮細胞永生系;N/N1003A(RLE)舒尼替尼堿(標準品)Sunitinib base質量規格:HPLC>98%,標準品
實驗通用規則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
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