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儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
產品名稱 | WB封閉液BSA |
檢測方法 | 詳見說明 |
規格 | 100ml |
貨號 | BK-S64191 |
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
實驗通用規則:
HBL-100 人整合 SV40基因的上皮細胞柳胺酚,利膽酚(標準品)質量規格:>98%,標準品2-Hydroxy-N-(4-hydroxyphenyl)-benzamide
CM-R099大鼠表皮色素細胞*培養基100mL柳胺酚,利膽酚質量規格:>98%,BR2-Hydroxy-N-(4-hydroxyphenyl)-benzamide
Saos-2,人成骨肉瘤細胞甲磺酸瑞波西汀質量規格:>97%Reboxetine mesylate
EB病毒轉化的人B細胞;KMY0927 人脂肪細胞*培養基 100mL酮色林,凱他色林質量規格:>98%,BRKetanserin
小鼠雪旺細胞MSC殼聚糖(M.W70w-100w)質量規格:脫乙酰度≥95%,,粘度100-200 mpa.sChitosan
人臍動脈內皮細胞 Human鹽酸米托蒽醌(標準品)質量規格:HPLC>98%,標準品Mitoxantrone HCl
FCGR3 Others Mouse 小鼠 FCGR3 / CD16 人細胞裂解液 (陽性對照) 咪唑立賓質量規格:>98%,細胞培養級Mizoribine
大鼠肝細胞;IAR20鹽酸美西律(標準品)質量規格:含量測定Mexiletine
REG4 Others Rat 大鼠 REG4 人細胞裂解液 (陽性對照) 美洛西林鈉質量規格:>96%,CP,BRMezlocillin
人前列腺平滑肌細胞*培養基 100mL美洛西林鈉(標準品)質量規格:HPLC>98%,標準品Mezlocillin
HCCC-9810(人肝內膽管癌細胞) 5×106cells/瓶×23-metxoxypxenylaceticacid3-甲氧基5克BR,75%水溶液
APP Others Human 人 APP / Protease nexin-II 人細胞裂解液 (陽性對照) 1 1-二芐基-4 4-二錄化二嗡水合物 1,1'-DIBqNZYL-4,4'-BIPYRIDINIUM DICHLORIDq 110-19-8
人肺微血管內皮細胞裂解物HPMECL四水錄化錳(II) Mcngcnqsq chloridq tqtrchydrctq 13446-34-9
XPNPEP2 Others Human 人 XPNPEP2 / X-Pro aminopeptidase 2 人細胞裂解液 (陽性對照) (+)-Catechinhydrate(+)-兒茶速500U高,98%
BRL 大鼠肝細胞(s)-(+)-2-基-1-L-Alaninol
WB封閉液BSA人絨毛膜內皮細胞 Human硫酸阿米卡星,硫酸丁胺卡那霉素Amikacin Sulfate 質量規格:含量674-786ug /mg,USP30
EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸阿米卡星(標準品)Amikacin Sulfate 質量規格:效價測定
人無色素睫狀上皮細胞HNPCEpiC兩性霉素BAmphotericin B質量規格:>750ug /mg,USP,細胞培養級
NOV Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells ansfected Lysate (positive corol) (denatured)兩性霉素B(標準品)Amphotericin B質量規格:含量測定
恒河猴腎細胞;LLC-MK2醋酸增血壓素Angiotensin Acetate質量規格:>98%,BR
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