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產品名稱 | 膜蛋白提取試劑盒 |
檢測方法 | 詳見說明 |
規格 | 50T |
貨號 | BK-S64209 |
儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
Hep 3B(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2垂體腺苷酸環化酶激活肽-27,人,小鼠,綿羊,豬,大鼠PACAP-27 (human, mouse,ovine, porcine, rat)質量規格:>95%,BR
AGRP Others Human 人 AgRP 人細胞裂解液 (陽性對照) 垂體腺苷酸環化酶激活肽-27(6-27),人,雞,小鼠,豬,大鼠PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)質量規格:>95%,BR
人角膜上皮細胞HCEpiC垂體腺苷酸環化酶激活肽-38(16-38),人,雞,小鼠,綿羊,豬,大鼠PACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)質量規格:>95%,BR
SECTM1 Others Human 人 SECTM1 / K12 人細胞裂解液 (陽性對照) 垂體腺苷酸環化酶激活肽相關肽(1-29),大鼠PACAP-Related Peptide (1-29)(rat)質量規格:>95%,BR
HMy2.CIR 人 B 母細胞胰多肽,人Pancreatic Polypeptide,human質量規格:>95%,BR
EGFL7 Protein Mouse 重組小鼠 EGFL7 / VE-statin 蛋白 (His 標簽)醋酸艾塞那肽質量規格:度98%以上Exenatide Acetate/Exendin-4
TG-905(人腦膠質母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 心臟微血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)非那雄胺質量規格:>99%,BRFinasteride
大鼠海馬神經元RN-h依諾沙星(水溶性)質量規格:依諾沙星含量≥60%Enoxacin
TAOK3 Others Human 人 TAOK3 / JIK / MAP3K18 (aa 1-411) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 氧氟沙星質量規格:>98.5%,BR,可用于細胞培養 Ofloxacin
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7氧氟沙星(標準品)質量規格:HPLC>98%,標準品Ofloxacin
NRK-49F 大鼠正常腎成纖維細胞2′-脫氧肌苷-5′-單嶙酸二鈉鹽容量:RT1克
豹貓肺成纖維樣細胞;LCL3DL-3-醇 3-Pyrrolidinol 40499-83-0
CNE1, 人鼻咽癌細胞系1,6-己二醇容量:100克
人纖維肉瘤細胞;HT-1080 大鼠腸平滑肌細胞*培養基 100mLMaltose飴糖100U高,98%
腦靜脈血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)叔丁基tert-Butylmetxyl
膜蛋白提取試劑盒CSF3 Protein Human 重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)硫酸長春新堿/硫酸醛基長春堿(標準品)Vincristine Sulfate質量規格:HPLC≥98%,標準品
THP-1(人髓系白血病單核細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠成肌細胞;C2C12帕唑帕尼Pazopanib質量規格:>99%,BR
人小梁網細胞裂解物HTMCL非洛地平/非氯地平Felodipine質量規格:>98%,USP30,BR
AMICA1 Others Mouse 小鼠 AMICA1 / JAML 人細胞裂解液 (陽性對照) 非洛地平(標準品)Felodipine質量規格:>98%,標準品用于含量測定
小鼠胚胎成纖維細胞;PA3176-硫鳥嘌呤(進分)6-TG/Thioguanine質量規格:>98%,進分,Sigma A4882
實驗通用規則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
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