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儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
產品名稱 | 血液基因組柱式小量提取試劑盒 |
檢測方法 | 詳見說明 |
規格 | 50次 |
貨號 | BK-S64306 |
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測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
實驗通用規則:
JAR細胞,胚絨毛癌細胞 人肺腺癌細胞,LTPEP-a-2細胞 KM3, 人多發性骨髓瘤細胞2'-甲氧基腺;2'-O-腺苷質量規格:>98%,BR2'-O-Methyladenosine
貓腎細胞;F81D-纈氨酸質量規格:>98%,BRD-Valine
TNFSF9 Others Mouse 小鼠 4-1BBL / TNFSF9 人細胞裂解液 (陽性對照) 2'-脫氧鳥苷-3'-單1酸二鈉質量規格:>98%,BR2'-Deoxy-3'-guanylic acid di salt
CL-0395NCI-H2227(人小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2N-乙酰-DL-甲硫氨酸質量規格:0.99N-Acetyl-DL-mine
CADM3 Others Rat 大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-高半胱氨酸質量規格:0.95DL-Homocysteine
VNN1 Others Human 人 VNN1 / Vanin-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,6-萘二羧酸(>98.0%(GC)(T))2,6-Naphthalenedicarboxylic Acid質量規格:>98.0%(GC)(T)
非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E21,4-萘二羧酸(>95.0%(T))1,4-Naphthalenedicarboxylic Acid質量規格:>95.0%(T)
TSPAN7 Others Cynomolgus 食蟹猴 TALLA-1 / TSPAN7 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,4-雙(基硅基)-1,3-丁二炔(>99.0%(GC))1,4-Bis(trimethylsilyl)-1,3-butadiyne質量規格:>99.0%(GC)
CL-0237U251(人膠質瘤細胞)5×106cells/瓶×21-代丁炔(含穩定劑銅屑)(>98.0%(GC))1-Butynyl Iodide (stabilized with Copper chip)質量規格:>98.0%(GC)
MM96L細胞,色素瘤細胞 人急性成髓細胞白血病,Kasumi-1細胞 人導管瘤細胞;BT-4743-丁炔(>98.0%(GC))3-Chloro-1-butyne質量規格:>98.0%(GC)
Hep G2(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×23A-氨基-3A-脫氧-(2AS,3AS)-α-環糊精水合物(>90.0%(HPLC))質量規格:>90.0%(HPLC)3A-Amino-3A-deoxy-(2AS,3AS)-α-cyclodextrin Hydrate
ACY1 Others Mouse 小鼠 ACY1 / Aminoacylase-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 3A-氨基-3A-脫氧-(2AS,3AS)-γ-環糊精水合物(>95.0%(HPLC))質量規格:>95.0%(HPLC)3A-Amino-3A-deoxy-(2AS,3AS)-γ-cyclodextrin Hydrate
人心臟成纖維細胞總RNAHCF NA6-O-α-D-麥芽糖基-β-環糊精(>98.0%(HPLC))質量規格:>98.0%(HPLC)6-O-α-D-Maltosyl-β-cyclodextrin
CROT Others Human 人 CROT (474 Leu/Val) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 基-β-環糊精(>98.0%(HPLC))質量規格:>98.0%(HPLC)Trimethyl-β-cyclodextrin
敘利亞倉鼠肌肉細胞;GH-M13,5-雙[3,5-雙(芐氧基)芐氧基]芐溴(>97.0%(HPLC))質量規格:>97.0%(HPLC)3,5-Bis[3,5-bis(benzyloxy)benzyloxy]benzyl Bromide
血液基因組柱式小量提取試劑盒DDR2 Others Mouse 小鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人細胞裂解液 (陽性對照) 萘丁美酮/萘普酮(標準品)Nabumetone質量規格:HPLC>98%,標準品
人成纖維細胞-新生兒裂解物HDF-n L地瑞拉韋Darunavir質量規格:>98%
IGFBP6 Others Mouse 小鼠 IGFBP6 / IBP-6 人細胞裂解液 (陽性對照) 沃氏物Methoxydienone質量規格:含量≥85%
C2C12 小鼠成肌細胞DL-α-羥基戊二酸二鈉DL-α-Hydroxyglutaric acid di salt 質量規格:98%,GC,進分sigma 94577
CL-0110HL-60(人早幼粒急性白血病細胞)5×106cells/瓶×2地美溴胺Demecarium Bromide 質量規格:>99%,BR
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