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儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
產品名稱 | siRNA轉染試劑 |
檢測方法 | 詳見說明 |
規格 | 500μl |
貨號 | BK-S64409 |
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測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
實驗通用規則:
P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤細胞 Mouse myeloma cell line P3X63Ag8.653 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS多奈哌齊質量規格:>98%Donepezil
IL12A & IL12B Protein Human 重組人 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白多尼培南(標準品)質量規格:>99%,標準品,一水合物Doripenem
USMC(大鼠血管平滑肌細胞) 5×106cells/瓶×2 HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞米爾貝1質量規格:A3+A4>97%Milbemycin oxime
CM-R089大鼠皮膚肥大細胞*培養基100mL伐地考昔質量規格:>99%,BRValdecoxib
CD14 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD14 人細胞裂解液 (陽性對照) 胃膜素,胃粘蛋白,人胃泌素質量規格:>98%,BRGastrin I,human
滑膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)4-硝基鄰苯二甲腈(>98.0%(GC))4-Nitrophthalonitrile質量規格:>98.0%(GC)
TNFRSF11A Others Rat 大鼠 TNFRSF11A 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-硝基鄰苯二甲腈(>98.0%(GC))3-Nitrophthalonitrile質量規格:>98.0%(GC)
大鼠大隱靜脈內皮細胞*培養基 100mL4,4'-雙甲氧基三苯氯DMT-CL質量規格:>97%
293FT人胚腎細胞-用于慢病毒包裝 Human embryonic kidney cell line 293FT - for leiviral packaging 人胚腎細胞N-苯甲酰-N-苯基羥胺;鉭試劑;BPHAN-Phenylbenzohydroxamic Acid;Tantalon質量規格:>98%;AR
IFNA14 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 蛋白 (His 標簽)6-氯鳥嘌呤核苷6-Chloroguanosine質量規格:>98%,BR
中國倉鼠肺細胞;V79異蓮心堿(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Isoliensinine
GHR Others Mouse 小鼠 GHR 人細胞裂解液 (陽性對照) 蓮心堿高氯酸鹽(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Liensinine Perchlorate
細胞凍存液CFM丁1基苯酞(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品川芎提取,液體3-Butylidenephthalide
FLT3 Others Mouse 小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 茯苓酸(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Pachymic acid
人胃腺癌細胞;BGC-823大黃素(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Emodin
siRNA轉染試劑腎系膜細胞Many types of cells包裝:5 ×105方(1ml)雙羥萘酸(標準品)Pamoic acid質量規格:含量測定
AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細胞裂解液 (陽性對照) 酚酞(標準品)Phenolphthalein質量規格:含量測定
大鼠前列腺上皮細胞*培養基 100mL香草醛(熔點標準品) Vanillin質量規格:熔點測定
BRL大鼠肝細胞 Rat hepatic cells BRL DMEM+10%FBS環吡酮;環匹羅司Ciclopirox質量規格:>99%,BR
IGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (Fc 標簽)環吡酮;環匹羅司(標準品)Ciclopirox質量規格:HPLC>99%,標準品
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