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儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
產品名稱 | 脲酶 EC3.5.1.5 |
檢測方法 | 詳見說明 |
規格 | 10KU/瓶 |
貨號 | BK-S64420 |
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測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
實驗通用規則:
PDE9A Others Human 人 PDE9A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鐵蛋白質量規格:BR,20%水溶液Ferritin
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)鵝去氧膽酸(標準品)質量規格:HPLC>97%,標準品Chenodeoxycholic acid
FRhK-4細胞,恒河猴胚腎細胞 人胚胎胰腺組織來源細胞,CCC-HPE-2細胞 CM-M064小鼠前列腺上皮細胞*培養基100mL鵝去氧膽酸質量規格:>98%Chenodeoxycholic acid
大鼠癌細胞;MADB106(牛)質量規格:BR,27U/mg,進分INSULIN
IL1RAP Others Human 人 IL1R3 人細胞裂解液 (陽性對照) 雙羥萘酸(標準品)質量規格:含量測定Pamoic acid
PLAUR Others Mouse 小鼠 uPAR / PLAUR / CD87 人細胞裂解液 (陽性對照) 4'-戊基苯乙酮(>95.0%(GC))4'-Pentylacetophenone質量規格:>95.0%(GC)
家貓肺細胞;FCA-L24-(反-4-丙基環己基)苯腈(>98.0%(GC))4-(trans-4-Propylcyclohexyl)benzonitrile質量規格:>98.0%(GC)
Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S2 (aa 726-1296) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 4-磺酰杯[4]芳烴水合物(>94.0%(T))4-Sulfocalix[4]arene Hydrate質量規格:>94.0%(T)
腦靜脈血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)4-磺酰杯[6]芳烴水和物(>95.0%(HPLC))4-Sulfocalix[6]arene Hydrate質量規格:>95.0%(HPLC)
HUVEC, 人臍靜脈內皮細胞 人上皮性卵巢癌細胞,TOV-112D細胞 RH-35(肝癌細胞)4-磺酸杯[8]芳烴水合物(>98.0%(HPLC)(T))4-Sulfocalix[8]arene Hydrate質量規格:>98.0%(HPLC)(T)
CL-0086GNM(人口腔鱗癌頸結轉移癌細胞)5×106cells/瓶×2WATER,STERILE,NUCLEASE-FREE無菌水(無核酸酶,DEPC處理過)生物技術級透明無色液體RTsigma
NRK-52E,大鼠腎細胞酚試劑 3-Mqthyl-2-bqnzothiczolinonq hydrczonq xy7nochloridq monohydrctq 38894-11-0
EB病毒轉化的人B細胞;KM932 人臍動脈內皮細胞*培養基 100mLURIDINE-5'-TRIPHOSPHATE5'-三嶙酸尿苷三鈉超級白色粉末FROZENsigma
人脈絡叢內皮細胞RNAHCPEC miRNA5 μgHISTOCHOICEMOUNTINGMEDIA封組織學級無色至微黃液體RTsigma
IL23 Others Marmoset 狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 9003-53-6聚本 500Polystyrene
脲酶 EC3.5.1.5HDBEC-c adult 人類皮膚血內皮細胞(HDBEC)來自成年捐獻者 500,000cells 角膜上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)溴酚紅鈉Bromophenol red, salt質量規格:>80%,Ind Grade
食管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)硬脂酸丁酯(>98%,BR)Butyl stearate質量規格:>98%,BR
EPHA3 Others Mouse 小鼠 EphA3 (aa 569-984) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) C10E6,10%溶液C10E6質量規格:BR
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1F3C12E10,10%溶液C12E10質量規格:BR
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A 肺癌細胞,LLC Lewis細胞 PCK細胞,大黃魚腎細胞C12E9, 10%溶液C12E9質量規格:BR
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