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儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
產品名稱 | DMEM無糖培養基 |
檢測方法 | 詳見說明 |
規格 | 500ml |
貨號 | BK-S64448 |
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測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
實驗通用規則:
R9[PR9]小鼠骨髓基質細胞 R9[PR9] mouse bone marrow somal cells 1640+10%FBS+5uM 吉非替尼利福平;利發霉素質量規格:≥97%,BR,可用于細胞培養Rifampicin
IL12A & IL27B Protein Human 重組人 IL12A & IL27B Heterodimer 蛋白利福平(標準品)質量規格:>98%,標準品Rifampicin
SW 780(人膀胱移行細胞癌) 5×106cells/瓶×2 5637(人膀胱癌細胞)泮托拉唑鈉1.5水合物質量規格:>98%,BRPantoprazole Sesquihydrate
CM-M099小鼠表皮色素細胞*培養基100mL泮托拉唑鈉1.5水合物(標準品)質量規格:HPLC≥99%,標準品Pantoprazole Sesquihydrate
IFNA13 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人細胞裂解液 (陽性對照) (S)-10-羥基喜樹堿;10-羥基喜樹堿質量規格:>98%,BR(s)-10-hydroxycamptothecin
NK-92MI細胞,人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細胞 表達HBV病毒的人肝細胞,HepG2.2.15細胞 CL-0192RBL-2H3(大鼠嗜堿性細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×27-羥基甲氨蝶呤7-Hydroxy Methotrexate質量規格:美國進口
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-218-羥基甲氨蝶呤-d37-Hydroxy Methotrexate-d3質量規格:美國進口
KIRREL Others Mouse 小鼠 KIRREL1 / NEPH1 人細胞裂解液 (陽性對照) 5'-O-三苯胸苷Trt-dT質量規格:>98%,BR
角臘上皮細胞生長添加物CEpiCGS5'-DMT-5--2'-脫氧尿苷DMT-5-I-dU質量規格:>98%,BR
CD320 Others Mouse 小鼠 CD320 / 8D6A 人細胞裂解液 (陽性對照) DMT保護性-2'-氟脫氧尿苷DMT-2'-F-dU質量規格:>98%,BR
NCI-H446(人小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2白當歸素(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Byakangelicin
C-33 A(人子細胞) 5×106cells/瓶×2 T-107B中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL 人導管癌細胞;ZR-75-30白果內酯(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品(−)-Bilobalide
水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S1白花前胡醇(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Peucedanol
F11R Others Rat 大鼠 JAM-A / F11R 人細胞裂解液 (陽性對照) 環杷明;環巴胺;去氧芥芬胺(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品;Hh信號通路拮抗劑,作用于SmoCyclopamine
人支氣管上皮細胞*培養基 100mL奧昔布寧N氧化物質量規格:美國進口Oxybutynin N-Oxide
DMEM無糖培養基SW620細胞,結腸癌細胞 人肝癌亞力山大細胞,HCCC-9810細胞 CL-0040BT-474(人導管癌細胞)5×106cells/瓶×2他唑巴坦(標準品)Tazobactam Acid質量規格:HPLC>99%,標準品
中國倉鼠卵巢細胞;CHONAD;氧化型輔酶I;β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸水合物β-Nicotinamide adenine dinucleotide hydrate(β-NAD)質量規格:>98%,BR
MCAM Others Human 人 CD146 / MCAM 人細胞裂解液 (陽性對照) NAD;氧化型輔酶I;β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸水合物β-Nicotinamide adenine dinucleotide質量規格:>98%,BR
髓核細胞生長添加物NPCGSβ-NADP;β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸1酸;氧化型輔酶 IIβ-NADP質量規格:>95%,BR
SERPINB9 Others Human 人 SerpinB9 / CAP-3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鳥嘌呤鹽酸鹽Guanine HCl質量規格:>99%,BR
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