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儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
產品名稱 | c-Jun Phospho-Ser73 Antibody |
檢測方法 | 兔多克隆抗體 |
規格 | 50μl |
貨號 | BK-S64487 |
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測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
實驗通用規則:
SHZ-88(大鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×2石榴皮鞣素(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Punicalin
HFDPC-c 人類的毛細胞(HFDPC) 500,000cells 膀胱平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)石杉堿甲(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品(−)-Huperzine A
支氣管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)矢車菊素-3-O-葡萄糖苷(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Cyanidin-3-O-glucoside chloride
IFNA8 Others Human 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人細胞裂解液 (陽性對照) 紅花甙; 紅花黃色素質量規格:色價E(1%)=150;紅花黃色素含量>95%Carthamine;Safflower Yellow
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA生長激素釋放因子-2質量規格:>95%,BRGHRP-2
綠色熒光蛋白標記人胃癌細胞;MGC803-GFP硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸Thionicotinamide adenine dinucleotide質量規格:美國進口
USP46 Others Human 人 USP46 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (R)-9-[2-(二乙基1酰基甲氧基)丙基]腺嘌呤(R)-9-[2-(Diethylphosphonomethoxy)propyl] Adenine質量規格:美國進口
人絨毛膜內皮細胞7-羥基-3-羧酸(>98.0%(HPLC))7-Hydroxycoumarin-3-carboxylic Acid質量規格:>98.0%(HPLC)
RA, 大鼠星形膠質細胞 Y-99細胞 CV-1(非洲綠猴腎細胞)7-二乙氨基-4-(>98.0%(GC)(T))7-Diethylamino-4-methylcoumarin質量規格:>98.0%(GC)(T)
人胎盤絨膜癌細胞;BeWo鈣黃綠素藍水合物[用于配位滴定銅時的指示劑]Methyl Calcein Blue Hydrate質量規格:用于配位滴定銅時的指示劑
人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3十六烷基基溴化100克
CD40 Others Mouse 小鼠 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,4,4-三基-2-務1 2,4,4-TRIMqTHYL-2-PqNTqNq 107-40-4
MSTO-211H 人肺癌細胞株無水檸檬酸250毫克保存:-20℃
NCI-H1299人非小細胞肺癌細胞 NCI-H1299 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS角豆膠100毫升2~8℃
GRN Protein Mouse 重組小鼠 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 (His 標簽)328-50-72-酮戊二酸(+4℃)2-Ketoglutaric acid
c-Jun Phospho-Ser73 Antibody胃癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)/1ml心鈉素Ⅱ,大鼠,小鼠,兔Atriopeptin II (rat, rabbit,mouse)質量規格:>95%,BR
IZUMO4 Others Human 人 IZUMO4 / C19orf36 人細胞裂解液 (陽性對照) 心鈉素Ⅲ,大鼠Atriopeptin III (rat)質量規格:>95%,BR
大鼠膀胱平滑肌細胞*培養基 100mL帶3蛋白質(547-553),人Band 3 Protein (547-553)(human)質量規格:>95%,BR
NR8383大鼠肺泡巨噬細胞 Alveolar macrophages of NR8383 rats F12K培養基(SIGMA)+20%FBS帶3蛋白質(824-829),人Band 3 Protein (824-829)(human)質量規格:>95%,BR
IGFBP2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP2 蛋白 (His 標簽)堿性成纖維生長因子bFGF (119 - 126), BasicFibroblast Growth Factor,human, bovin質量規格:>95%,BR
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