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產品名稱 | NFκB-p65 Phospho-Thr254 Antibody |
檢測方法 | 兔多克隆抗體 |
規格 | 50μl |
貨號 | BK-S64493 |
儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
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測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
SLIK1 Others Human 人 SLIK1 人細胞裂解液 (陽性對照) 鳶尾黃素(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Tectorigenin
CL-0087H4(人腦神經膠質瘤細胞)5×106cells/瓶×2原B2(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Procyanidin B2
IgG2 Others Human 人 IgG2-Fc (257 Ser/Ala) 人細胞裂解液 (陽性對照) 原人參二醇(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Protopanaxdiol
小鼠直腸平滑肌細胞*培養基 100mL原人參三醇(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Protopanaxatriol
SV40 MES 13小鼠腎小球系膜細胞 SV40 MES 13 in mouse glomerular mesangial cells DMEM培養基+5%FBS愈創甘油(標準品)質量規格:含量測定Guaifenesin
貓星形腦膠質細胞;PG-4(S+L-)苯并[a]蒽(>98.0%(GC))Benz[a]anthracene質量規格:>98.0%(GC)
CDCP1 Others Human 人 CDCP1 / CD318 人細胞裂解液 (陽性對照) 1H-環五[l]菲(>95.0%(GC))1H-Cyclopenta[l]phenanthrene質量規格:>95.0%(GC)
人前列腺平滑肌細胞*培養基 100mL9-氨基喜樹堿9-Aminocamptothecin質量規格:美國進口
A-431細胞,人表皮癌細胞 流感嗜血桿菌 BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1(R)-7-乙基喜樹堿(R)-7-Ethyl Camptothecin質量規格:美國進口
CCL18 Protein Human 重組人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 (His 標簽)7-乙基-喜樹堿-d37-Ethyl-d3-camptothecin質量規格:美國進口
人前列腺平滑肌細胞cDNAHPSMC cDNA乳糖-明膠培養基10克RT
EED Others Human 人 EED / Embryonic Ectoderm Developme 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 放現菌速 D cCTINOMYCIND 20-6-0
雜交瘤(B類);C3110D2B2化乙酰膽堿 (培養... Acetylcholine chloride (cell culture t... 60-31-1 25G 核酸衍生物
BT549細胞,管癌細胞 人喉癌細胞,M4e細胞 大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)DEXTRAN葡聚糖(分子量10000)試劑級白色粉末RTsigma
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A4(葉酸
NFκB-p65 Phospho-Thr254 Antibody穩定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E外消旋5-羥去異丙基托特羅定-d6rac 5-Hydroxymethyl Desisopropyl Tolterodine-d6質量規格:美國進口
CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 外消旋去異丙基托特羅定rac Didesisopropyl Tolterodine質量規格:美國進口
人腎管狀上皮細胞*培養基 100mL外消旋5-羥托特羅定rac 5-Hydroxymethyl Tolterodine質量規格:美國進口
B16F1細胞,小鼠色素瘤細胞 MRC-5(胚肺細胞) Asp2人胚胎腎細胞轉化細胞;FC33外消旋5-羧基去異丙基托特羅定rac 5-Carboxy Desisopropyl Tolterodine質量規格:美國進口
CCL6 Protein Mouse 重組小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 (His 標簽)S-(-)-托特羅定S-(-)-Tolterodine質量規格:美國進口
實驗通用規則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
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