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儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
產品名稱 | p53 Phospho-Ser33 Antibody |
檢測方法 | 兔多克隆抗體 |
規格 | 50μl |
貨號 | BK-S64556 |
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測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
實驗通用規則:
白細胞介素-17超家族非草隆(標準品)質量規格:分析標準品Fenuron
人腦血管周細胞 (HBVP) ( 5×105 ) 人臍靜脈平滑肌細胞 MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細胞丁(B9)(標準品)質量規格:分析標準品Daminozide
CM-R041大鼠肝星形細胞*培養基100mL麗絲胺羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B 質量規格:BSSulforhodamine B
IFNGR1 Others Rat 大鼠 IFNGR / IFNGR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 麗絲胺羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B 質量規格:BS Sulforhodamine B
人脊柱間充質干細胞HVMSC氯化羅丹明110;羅丹明110質量規格:>99%Rhodamine 110 chloride
大鼠腎系膜細胞;RMC 骨肉瘤細胞,U-2 OS細胞 Walker-256細胞,大鼠肝癌細胞(癌細胞接種到肝臟成瘤)D-賴氨酸鹽酸鹽H-D-Lys-OH·HCl質量規格:>99%,BR
HCT116, 人結直腸癌細胞 HumanD-甘露糖(標準品)D-Mannose質量規格:HPLC≥98%,標準品
MSTN Others Mouse 小鼠 MSTN / GDF8 人細胞裂解液 (陽性對照) N-辛?;?/span>-N-葡糖胺(MEGA-8)N-Octanoyl-N-methylglucamine質量規格:≥97% ,進分
平衡鹽溶液HBSSN-癸?;?/span>-N-葡糖胺(MEGA-10)N-Decanoyl-N-methylglucamine 質量規格:>98%,BR
IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人細胞裂解液 (陽性對照) 辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷n-Octyl-β-D-Thioglucopyranoside質量規格:>98%,BR
小鼠中腦縫神經細胞(腦脊)(MN-r)(1×106) HT-29, 人結腸癌細胞 HumanLGD-4033 質量規格:>98%,BRLGD4033
兔主動脈平滑肌細胞;SMC5-溴嘧啶質量規格:>98%5-Bromopyrimidine
CSK Others Mouse 小鼠 CSK / C-Src kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 阿螺旋霉素質量規格:HSP90 抑制劑,進分17-DMAG
臍動脈內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)大豆異黃酮質量規格:染料木素17%-20%,異黃酮含量在40-50%Soybean isoflavones
蚊子幼蟲體細胞;Aedes albopictus clone C6/36 人肺癌細胞,NCI-H1299細胞 A-431(表皮癌細胞)表戈米辛O(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Epigomisin O
p53 Phospho-Ser33 AntibodyHFL1人胚肺成纖維細胞 HFL1 in human embryo lung fibroblasts F12K培養基+10%FBS鋅試劑(≥85%(HPLC))Zincon質量規格:≥85%(HPLC)
SCGB1A1 Protein Mouse 重組小鼠 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 (His 標簽)1,3-二-5-吡唑酮1,3-Dimethyl-5-pyrazolone質量規格:0.96
人胚腎二倍體細胞;CCC-HEK-1 人氣管上皮細胞*培養基 100mL氟啶胺(標準品)Fluazinam質量規格:分析標準品
小鼠骨髓瘤細胞;Sp2/0-Ag14氟節胺(標準品)Flumetralin質量規格:分析標準品
CD300A Others Human 人 CD300A 人細胞裂解液 (陽性對照) 氯吡脲(標準品)Forchlorfenuron質量規格:分析標準品
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