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實驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:
① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
植物銨態氮測試盒可見分光光度法 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 | BK-01S6499 |
商品介紹:
測定意義: 氮素是構成生物體的一種必需元素,自然界中的氮素循環包括許多轉化作用。空氣中的氮氣被固氮微生物及植物與微生物的共生體固定成氨態氮,經過硝化微生物的作用轉化成硝態氮,后者被植物或微生物同化成有機氮化物,植物組織氨氮含量可反映植物受脅迫的程度。 測定原理 銨態氮在強堿性介質中與次氯酸鹽和作用,生成水溶性染料靛酚藍,在625nm處有特征吸收峰,吸光值與銨態氮含量成正比。 自備實驗用品及儀器 天平、常溫離心機、酶標儀、96孔板、蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
2 ug SD1211-chip- 2 SD1211-chip- 2 低溫運輸,-20℃保存
100g DN EDTA 2Na
2 ug pET-30c(+) pET-30c(+) 低溫運輸,-20℃保存
沙氏葡萄糖液體培養基(SDB) 500ml*20瓶
1瓶 B16F10細胞株 B16F10 低溫運輸和保存
沙氏葡萄糖瓊脂培養基顆粒 Sabouraud’s Glucose Agar Medium 300ml/袋*10
1瓶 CCC-HPF-1細胞株 CCC-HPF-1 低溫運輸和保存
2 ug PT2-Venus PT2-Venus 低溫運輸,-20℃保存
100mL RNase-free Tris HCl,1M,pH 7.0 常溫
2 ug pDC312 pDC312 低溫運輸,-20℃保存
皰肉牛肉粒 Dried Meat Particle 100g
植物銨態氮測試盒可見分光光度法phospho-ADRB2(Ser346) 磷酸化上素能受體β2抗體 規格: 0.1ml
MCKD2/UMOD 尿調節蛋白抗體 規格: 0.1ml
NCX3 鈉鈣交換蛋白3抗體 規格: 0.2ml
Slc22a5 溶質載體家族蛋白22成員5抗體 規格: 0.2ml
ANT-1/ATP carrier protein 1/Adenine Nucleotide Translocase 1 嘌呤核苷酸轉運蛋白1抗體 規格: 0.2ml
FHL2 相互作用蛋白FHL2抗體 規格: 0.1ml
phospho-SLC29A4(Tyr198) 磷酸化腦質膜單胺轉運蛋白PMAT抗體 規格: 0.1ml
NLK/Nemo-like kinase Nemo樣激抗體 規格: 0.1ml
PLK1 絲/蘇蛋白激Plk1抗體 規格: 0.1ml
PCID1 PCID1蛋白抗體 規格: 0.2ml
phospho-AMPK alpha 1(Thr172) 磷酸化苷單磷酸活化蛋白激α1抗體 規格: 0.1ml
Phospho-Stathmin(Ser38) 磷酸化原基因蛋白18抗體 規格: 0.1ml
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