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注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。
若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。
特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產品名稱:葡萄糖氧化酶(GOD)測試盒可見分光光度法
產品規格:50管/24樣
檢測方法:可見分光光度法
產品貨號:BK-01S6418
產品分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:
測定意義: GOD(EC 1.1.3.4)廣泛存在于動物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并產生H2O2,是生物體中產生活性氧的代謝途徑之一。 測定原理: GOD催化產生H2O2,過氧化物酶在有氧存在時催化H2O2分解產生的氧又將鄰聯茴香胺氧化生成有色物質,顏色深淺與葡萄糖氧化酶活性成線性關系。 試驗中所需的儀器和設備: 可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本: 先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
2 ug pMBP- C pMBP- C 低溫運輸,-20℃保存
營養肉汁 Nutrient Broth 250g
1瓶 RM-1細胞株 RM-1 低溫運輸和保存
乳糖膽鹽培養基 Lactose Bile Medium 250g
100g DEAE 纖維素 DEAE Cellulose 室溫干燥保存
50T 超級細菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
1000mL Tricine-SDS-PAGE配膠液 Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer 常溫保存
2 ug pBD-p53 pBD-p53 低溫運輸,-20℃保存
50次 分枝桿菌DNAout Myco DNAOUT 常溫
2 ug pET-19b pET-19b 低溫運輸,-20℃保存
血液瓊脂基礎 Blood agar base 250g
葡萄糖氧化酶(GOD)測試盒可見分光光度法phospho-AQP2(Ser269) 磷酸化水通道蛋白2抗體 規格: 0.1mlBCMA/CD269 B淋巴細胞成熟因子抗體 規格: 0.1ml
SLC6A19 鉀依賴鈉鈣交換蛋白6 規格: 0.1mlVillin 絨毛蛋白抗體 規格: 0.2ml
Phospho-CHK2 (ser516) 磷酸化細胞周期檢測點激2抗體 規格: 0.1mlTFAR19/PDCD5 凋亡相關蛋白5抗體 規格: 0.1ml
Donkey Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的驢抗兔IgG 規格: 0.1mlFactor VIII 第八因子抗體 0.1ml
Donkey anti-human IgG whole serum 驢抗人IgG抗清 規格: 1mlCBFA1/RUNX2 核心結合因子α1抗體(成骨特異性轉錄因子)Cbfα1 規格: 0.1ml
phospho-PRKCB(Ser642) 磷酸化蛋白激C抗體 規格: 0.1mlANKS6 錨蛋白重復及SAM結構域蛋白6抗體 規格: 0.2ml
HCV-NS1 丙型毒-NS1抗體 規格: 0.1mlphospho-CREB-1(Ser121) 磷酸化CREB-1抗體 規格: 0.1ml
HLC3/Kanadaptin 肺基因蛋白3抗體 規格: 0.2mlPCDHGC3/PCDH2 原鈣粘蛋白γC3抗體 規格: 0.2ml
BTG1 B細胞遷移基因1抗體 規格: 0.2mlphospho-IRAK4(Thr345) 磷酸化白介素-1受體相關激4抗體 規格: 0.1ml
IL-6 白介素6 規格: 0.1mlRNF150 環指蛋白150抗體 規格: 0.2ml
MUC13 粘蛋白13抗體 規格: 0.2mlPAGE4/GAGE9 前列相關蛋白4抗體 規格: 0.2ml
Clenbuterol Hydrochloride(Spiropent) /瘦肉抗體 0.1mlFAR2 脂肪酰輔A還原2抗體 規格: 0.2ml
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