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商品介紹:
測定意義: AAO是定位于植物細胞壁的糖蛋白,屬“藍銅氧化酶"家族。細胞壁內的抗壞血酸和AAO與細胞壁的代謝和生長有著密切的聯系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通過質膜上的細胞色素b還原,該過程中電子的跨膜運輸能夠促進細胞生長。 測定原理: AAO可直接氧化AsA,通過測定AsA的氧化量,可計算得AAO活力。 實驗中所需儀器及設備: 低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液器、研缽、冰、蒸餾水。 |
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
抗壞血酸氧化酶(AAO)測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6393 |
實驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:
① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
布氏肉湯添加劑 Brucella Broth Additive 2ml*5
100mg 素 B 硫酸鹽 Polymyxin B Sulfate 4℃保存
Littman瓊脂 Littman Agar 250g
20 mg L-Canavanine(iNOS抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250mL E. Coli Lysis Buffer-II,pH7.4 E. Coli Lysis Buffer-II,pH7.4 常溫保存
100mL 去離子甲酰胺 Deionized Formamide 4℃保存
2 ug pINIIIompA pINIIIompA 低溫運輸,-20℃保存
氣單胞菌鑒別瓊脂 Aeromonas Differential Agar 250g
1瓶 L6565細胞株 L6565 低溫運輸和保存
mTSB肉湯 mTSB Broth With Novobiocin 250g
5mg 羧肽 B( 豬胰 ) Carboxypeptidase B -20℃保存
抗壞血酸氧化酶(AAO)測試盒微量法PSMD10/Proteasome 26S S10 蛋白調解因子10抗體 規格: 0.2ml
TRIM35 TRIM35蛋白抗體 規格: 0.2ml
GRASP65 高爾基體外周膜蛋白p65抗體 規格: 0.2ml
CHKL/Ethanolamine kinase beta 乙醇胺激β抗體 規格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgM/Cy7 Cy7標記的小鼠抗人IgM 規格: 0.1ml
TCF9/GCF 轉錄因子9抗體 規格: 0.2ml
TANK TANK抗體 規格: 0.1ml
XTP4 毒X蛋白反轉錄蛋白4抗體 規格: 0.2ml
FRMD2/FRMPD1 FRMD2蛋白抗體 規格: 0.2ml
MARCH6 膜相關環指蛋白6抗體 規格: 0.2ml
SOAT1/ACAT1 酰基轉移1抗體 規格: 0.2ml
GLUT1 葡萄糖轉運蛋白1抗體 規格: 0.1ml
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