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實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產品名稱:血磷濃度測試盒微量法
產品規格:100管/96樣
檢測方法:微量法
產品貨號:BK-01S6794
產品分類:離子系列
商品介紹:
測定意義: 血磷主要指血中的無機磷,以無機磷鹽的形式存在。血漿中鈣、磷濃度關系密切,在以mg/dL表示時,二者的乘積([Ca]×[P])為30~40。當([Ca]×[P])>40,則鈣和磷以骨鹽形式沉積于骨組織;若([Ca]×[P])<35則妨礙骨的鈣化,甚至可使骨鹽溶解,影響成骨作用。血鈣和血磷含量的相對穩定依賴于鈣、磷的吸收與排泄和鈣化及脫鈣兩種代謝的相對平衡。上述平衡受到D3、甲狀旁腺素和降鈣素等激素的調節。 測定原理: 去除血清中有機磷后,無機磷鹽與鉬酸銨試劑生成磷鉬酸,被還原后呈藍色,在620nm有光吸收;通過測定620 nm吸光度,計算血液中磷含量。 自備儀器和用品: 離心機、可調式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本: 先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。
若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。
50次 凝膠法miRNA分離試劑盒
2 ug pPyCAGIP pPyCAGIP 低溫運輸,-20℃保存
馬尿酸鈉 250g
5mg 抑制劑 Pepstatin A 4℃保存
50T 人免疫缺陷病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
5 mg Carboxy-PTIO (一氧化氮清除劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250mL Citrate Buffer(檸檬酸鹽緩沖液),0.5M,pH4.0 Citrate Buffer,0.5M,pH4.0 常溫保存
1袋 顯影粉 Developing Solution,Powder 室溫避光保存
2 ug phRL-TK phRL-TK 低溫運輸,-20℃保存
溶血瓊脂基礎 250g
2 ug pGCsi/H1/Neo GFP-NON pGCsi/H1/Neo GFP-NON 低溫運輸,-20℃保存
血磷濃度測試盒微量法phospho-P53(Ser315) 磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規格: 0.1mlWASF1/WAVE 1 WAVE1蛋白抗體 規格: 0.2ml
IKKα(Phospho-Thr23) 磷酸化KB抑制蛋白激α抗體 規格: 0.1mlDonkey Anti-Goat IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的驢抗羊IgG 規格: 0.1ml
DUSP22/JSP1 雙特異性磷酸22抗體 規格: 0.2mlAKAP6 蛋白激A錨定蛋白6抗體 規格: 0.2ml
Flightless 1 凝溶膠蛋白家族Fli-1抗體 規格: 0.2mlDEPDC1 細胞周期調控蛋白SDP35抗體 規格: 0.2ml
HSP22 熱休克蛋白-22抗體 規格: 0.1mlMYL7 肌球蛋白輕鏈7抗體 規格: 0.2ml
MAP7D1/RPRC1 /脯富含卷曲蛋白1抗體 規格: 0.2mlFBXO33 F-box蛋白相關蛋白33抗體 規格: 0.2ml
Runx3 Runx3抗體 規格: 0.1mlARHGAP32 Rho GTP激活蛋白32抗體 規格: 0.2ml
MEF2C 肌細胞增強因子2C抗體 規格: 0.1mlRGC32 補體應答基因32抗體 規格: 0.2ml
c-Maf 原基因cMAF抗體 規格: 0.1mlCaspase 14 半胱胺酸蛋白蛋白14抗體 規格: 0.2ml
BK channel BK通道蛋白抗體 規格: 0.1mlSarcomeric Alpha Actinin/ACTN2 α橫紋肌輔肌動蛋白/α-SCA抗體 0.1ml
ZCWCC1 ZCWCC1抗體 規格: 0.1mlCaspase 8 半胱蛋白8抗體 規格: 0.1ml
HCF2/Heparin Cofactor II 肝素輔助因子II抗體 規格: 0.2mlphospho-ATG4D(Ser15) 磷酸化自噬相關蛋白4D抗體 規格: 0.1ml
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