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實驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:
① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
血鋅濃度測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6795 |
商品介紹:
測定意義: 鋅是必需的微量元素之一,在胰島素和卟啉代謝中也起重要作用。 測定原理: 在pH 8.5~9.5的溶液中,Zn2+與鋅試劑生成藍色配位化合物,在620nm有最大吸收峰。 自備儀器和用品: 離心機、可調式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水和無水乙醇。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
無菌水樣采集袋(含0.4mg) Water Aseptic Sampling Bag 100個/箱
100U 化的β- 半乳糖苷 Biotin-β-Galctosidase -20℃保存
100mL Sodium Hydroxide Solution(氫氧化鈉溶液),10N Sodium Hydroxide Solution,10N 常溫保存
1 管 AH109酵母菌 AH109 Yeast Strain -80℃保存
2 ug pSHE-GFP pSHE-GFP 低溫運輸,-20℃保存
50次 葡萄球菌RNAout
2 ug pCMV5 (no Nde I) pCMV5 (no Nde I) 低溫運輸,-20℃保存
亞硫酸鐵瓊脂 250g
2 ug pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP 低溫運輸,-20℃保存
50T 人E-選擇素S128R基因多態性檢測試劑盒(PCR-RLFP) 低溫運輸,-20℃保存
25 mg SPQ(6-甲氧基-N-(3-磺丙基)) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
血鋅濃度測試盒微量法CD75 唾液酸轉移1/α-2,6唾液酸轉移抗體 規格: 0.2mlGalectin 3 半糖凝集素3抗體 規格: 0.1ml
Titin/CMD1G 擴張型心肌蛋白1G抗體 規格: 0.2mlCSFV/Classical swine fever virus 豬瘟毒抗體 0.2ml
SYTL5/slp5 突觸樣蛋白5亞型2抗體 規格: 0.1mlUbe2B 泛素激活2B抗體 規格: 0.2ml
PDZK3 前列激活蛋白抗體 規格: 0.2mlBCMP11/AGR3 膜蛋白11抗體(前梯度同源蛋白2) 規格: 0.2ml
DCN/Decorin 核心蛋白聚糖抗體 規格: 0.1mlRabbit Anti-rat IgM/Cy5 Cy5標記的兔抗大鼠IgM 規格: 0.1ml
polyprotein[Classical swine fever virus, CSFV] 抗豬繁與呼吸綜合征/豬藍耳毒抗體 0.2ml
Mouse Anti-Rabbit IgM/Gold 膠體金標記的小鼠抗兔IgM 規格: 2ml
B7H4 B7-H4抗體 規格: 0.1ml
FAM107A 細胞下調蛋白1抗體 規格: 0.2ml
NUAK2 SNF1/AMP激相關激2抗體 規格: 0.2ml
phospho-GAB2 (Tyr643) 磷酸化接蛋白Gab2抗體 規格: 0.1ml
Unc18-3 突觸囊泡融合蛋白Unc18-3抗體 規格: 0.2ml
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